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細胞信息：

WiDr人結腸癌細胞，直接來源于ATCC，公司海外直接購買，未經代理，細胞真實。購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，進口來源，質量保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

細胞到達客戶手中，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對細胞的真實性，支持客戶鑒定STR或者基因突變測序數(shù)據(jù)，如證明細胞錯誤，全額退款。

產品形式：

公司提供2種形式的產品：

1種是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，-80C也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；再者干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第2種是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

默認是發(fā)第2種，如果想要1種，需事先告知。

購買流程：

1.客戶確定訂購；

2.公司將合同發(fā)給客戶簽字（電子版或者紙質版），同時快遞發(fā)票給客戶；

3.由客戶報銷費用到公司賬戶。

4.報賬過程中，我公司將復蘇細胞，做QC。

5.QC通過，同時費用到賬，即可發(fā)貨給客戶（順豐）。

WiDr人結腸癌細胞 培養(yǎng)注意事項：

1.收到細胞后，請將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱，放置4小時，使細胞回到正常溫度。

2.將培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基用移液管吸到另一無菌瓶內，培養(yǎng)瓶內保留5-6ml培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)至少24小時方可傳代，吸出的培養(yǎng)基4度保存（如吸出培養(yǎng)基有較多碎片，3000轉離心10分鐘，取上清保存），用于后續(xù)培養(yǎng)。強烈建議您使用吸出培養(yǎng)基培養(yǎng)至少2-3代，并在更換新培養(yǎng)基前凍存幾支細胞。

3.如有Greiner細胞培養(yǎng)瓶，可取一個新的T25 flask，取其瓶蓋，更換原培養(yǎng)瓶的瓶蓋。如使用原瓶蓋，則需要稍稍擰松瓶蓋，使氣體能夠進入。

4.37度培養(yǎng)至少24小時，當細胞密度符合傳代要求時，PBS清洗細胞，加入1ml胰酶，消化細胞傳代。當80%以上細胞培養(yǎng)瓶輕輕晃動能脫落時，加培養(yǎng)基終止消化，吹打成單細胞，吸入15ml離心管，1000轉離心5分鐘。

5.離心后棄上清，加入新培養(yǎng)基吹打重懸細胞成單細胞，加入新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

6.用吸出培養(yǎng)基傳2-3代后請及時凍存細胞。

貼壁細胞凍存方法:

每個T75 或10cm培養(yǎng)皿的細胞消化離心后棄上清。加2ml細胞凍存液(90% FBS+10%DMSO),吹打均勻, 加入2個細胞凍存管。立即放入細胞凍存盒（Nalgene 5100-0001），加異丙醇到刻度線，放-80度冰箱。24小時后將凍存管轉到液氮中長期保存。