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細(xì)胞株培養(yǎng)上清液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和細(xì)胞代謝物分析
原載自:[行情動(dòng)態(tài)] 2022-11-11 瀏覽次數(shù):784
對(duì)于細(xì)胞株培養(yǎng)時(shí)上清液的收集,把要收集上清的細(xì)胞重新在一次性培養(yǎng)板中培養(yǎng),如果是貼壁細(xì)胞的話,在收集前24小時(shí),改用不全培養(yǎng)基培養(yǎng),即用不加血清的培養(yǎng)基。收集的時(shí)候,用移液槍吸取上清即可。
細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,為促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖提供物質(zhì)基礎(chǔ),是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。合成細(xì)胞培養(yǎng)基是用化學(xué)成分明確的試劑配制
的培養(yǎng)基,是目前常用的一類培養(yǎng)基,其組分穩(wěn)定,主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無機(jī)鹽類等。培養(yǎng)基組分的變化,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生一定影響,如細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)、分裂速度等。同時(shí),適宜的培養(yǎng)基組成與優(yōu)選的細(xì)胞培養(yǎng)工藝對(duì)于提高蛋白類藥物的產(chǎn)率,保證細(xì)胞培養(yǎng)批次之間的一致性、穩(wěn)定關(guān)鍵質(zhì)量屬性等因素至關(guān)重要。因此,尋求一類合適的培養(yǎng)基組成,對(duì)細(xì)胞株培養(yǎng)具有重大意義。
細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的分析,除形態(tài)學(xué)觀察外,還可對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞代謝物進(jìn)行分析,通過考察細(xì)胞上清液中營(yíng)養(yǎng)物和代謝物的變化,判斷細(xì)胞在生長(zhǎng)增殖過程中狀態(tài)的優(yōu)劣。鑒于此開發(fā)出了“細(xì)胞培養(yǎng)上清液方法包”,該技術(shù)可在短時(shí)間內(nèi)同時(shí)分析數(shù)十種細(xì)胞培養(yǎng)上清液營(yíng)養(yǎng)成份和代謝物的相對(duì)豐度變化。
使用高效液相色譜儀和三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用,結(jié)合“細(xì)胞培養(yǎng)上清液方法”建立了細(xì)胞培養(yǎng)上清液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和細(xì)胞代謝物的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的同時(shí)分析方法,可為相關(guān)研究人員評(píng)估細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)、改進(jìn)培養(yǎng)基組分提供參考。