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新聞動態(tài) / news
中科院細(xì)胞所分享細(xì)胞的計(jì)數(shù)步驟
原載自:[行情動態(tài)] 2019-09-13 瀏覽次數(shù):2057
中科院細(xì)胞所分享細(xì)胞的計(jì)數(shù)步驟
當(dāng)待測細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時(shí),通過測定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目,即可換算出每毫升細(xì)胞懸液中細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目。具體步驟如下:
1.將細(xì)胞制成細(xì)胞懸液;
2.將蓋玻片放在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的2個(gè)小室上;
3.吸取少許細(xì)胞懸液輕輕注入蓋玻片邊緣與計(jì)數(shù)板交界處;
4.100倍鏡下,用計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)每個(gè)小室的中央和四角的方格中的細(xì)胞;
5.只計(jì)數(shù)壓左邊中線和上邊中線的細(xì)胞;
6.分別用雙蒸水和75%酒精清洗計(jì)數(shù)板、蓋玻片,并擦干。
細(xì)胞計(jì)數(shù)的幾大要點(diǎn):
1.進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),要求懸液中細(xì)胞數(shù)目不低于1×107 L-1,如果細(xì)胞數(shù)目很少要進(jìn)行離心再懸浮于少量培養(yǎng)液中;
2.要求細(xì)胞懸液中的細(xì)胞分散良好,否則影響計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性;
3.取樣計(jì)數(shù)前,應(yīng)充分混勻細(xì)胞懸液,尤其時(shí)多次取樣計(jì)數(shù)時(shí)更要注意每次取樣都要混勻,以求計(jì)數(shù)準(zhǔn)確;
4.數(shù)細(xì)胞的原則是只數(shù)完整的細(xì)胞,若細(xì)胞聚集成團(tuán)時(shí),只按照1個(gè)細(xì)胞計(jì)算。如果細(xì)胞壓在格線上時(shí),則只計(jì)上線,不計(jì)下線,只計(jì)右線,不計(jì)左線;
5.操作時(shí),注意蓋片下不能有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中,否則要重新計(jì)數(shù)。
其中,初學(xué)者易犯的錯誤是計(jì)數(shù)前未將待測懸液吹打均勻。滴入細(xì)胞懸液時(shí)蓋玻片下出現(xiàn)氣泡。滴入懸液時(shí)的量太多,至使細(xì)胞懸液流入旁邊的槽中。