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細(xì)胞株的STR鑒定技術(shù)分享

原載自:m.niangtai.cn[技術(shù)資料頻道]  2025-03-17  瀏覽次數(shù):533

  細(xì)胞株的STR(短串聯(lián)重復(fù)序列)鑒定技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)研究中具有重要的地位。STR鑒定技術(shù)原理是基于不同個(gè)體或細(xì)胞株在基因組的特定區(qū)域中,短串聯(lián)重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)存在差異。這些短串聯(lián)重復(fù)序列廣泛分布于人類及多種生物的基因組中,具有高度的多態(tài)性。通過(guò)對(duì)細(xì)胞株的DNA進(jìn)行提取,利用特定的引物對(duì)目標(biāo)STR位點(diǎn)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后通過(guò)電泳分離不同長(zhǎng)度的DNA片段,從而確定細(xì)胞株的遺傳特征。
  該技術(shù)的操作流程相對(duì)復(fù)雜但精確。首先要有高質(zhì)量的細(xì)胞樣本,從細(xì)胞培養(yǎng)容器中收集適量的細(xì)胞,確保細(xì)胞數(shù)量足夠且活性良好。接著進(jìn)行DNA提取,這一過(guò)程要嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明操作,以獲得高純度、完整的DNA。隨后是PCR擴(kuò)增,根據(jù)選定的STR位點(diǎn)設(shè)計(jì)特異性引物,優(yōu)化PCR反應(yīng)體系,包括引物濃度、dNTP濃度、Taq酶量等,以確保高效、特異的擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過(guò)電泳分離后,通過(guò)專業(yè)的分析軟件對(duì)電泳圖譜進(jìn)行分析,確定每個(gè)STR位點(diǎn)的重復(fù)次數(shù),從而得到細(xì)胞株的STR圖譜。
  STR鑒定技術(shù)在細(xì)胞株鑒定中有諸多優(yōu)勢(shì)。其分辨率高,能夠區(qū)分單個(gè)堿基的差異,對(duì)于確認(rèn)細(xì)胞株的純度和身份非常準(zhǔn)確。它具有良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性,只要實(shí)驗(yàn)條件一致,不同實(shí)驗(yàn)室得到的結(jié)果具有可比性。而且可以同時(shí)對(duì)多個(gè)STR位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè),提高了鑒定的效率和準(zhǔn)確性。
  然而,該技術(shù)也存在一些局限性。例如在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中容易受到污染,導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)偏差。對(duì)DNA質(zhì)量要求較高,如果DNA發(fā)生降解或存在雜質(zhì),可能影響PCR擴(kuò)增效果。此外,對(duì)于一些特殊的細(xì)胞株,可能需要優(yōu)化引物設(shè)計(jì)或調(diào)整PCR反應(yīng)條件,才能獲得理想的結(jié)果。
  細(xì)胞株的STR鑒定技術(shù)為細(xì)胞生物學(xué)研究提供了可靠的工具,有助于保證細(xì)胞株的準(zhǔn)確性和一致性,在細(xì)胞庫(kù)管理、遺傳研究、藥物研發(fā)等領(lǐng)域發(fā)揮著難以替代的作用。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和完善,相信它將在更多方面展現(xiàn)出更大的價(jià)值。

 

 

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