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對細胞株的污染鑒定與處理解讀

原載自:m.niangtai.cn[技術(shù)資料頻道]  2022-09-09  瀏覽次數(shù):1123

   細胞株的無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可暫時放置,其它實驗用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%酒精擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在抬面之中央無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
  實驗室環(huán)境的污染也會造成細胞株培養(yǎng)的污染,所以實驗室環(huán)境要定期進行消毒。例如試驗臺、超凈臺、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門把手、電話等細胞培養(yǎng)環(huán)境被支原體污染,可引起細胞的污染。應(yīng)定期對工作區(qū)域進行消毒。
  在細胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達到63%,因而細胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。細胞培養(yǎng)中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染,估計細胞株培養(yǎng)的老手都知道,支原體污染非常不易察覺。有的實驗室被支原體污染后,如果不進行有效*的支原體清除,該實驗的細胞培養(yǎng)很難進行下去,細胞傳三代以后狀態(tài)就急劇下滑,無法進行正常實驗,有的實驗室甚至只能指望換細胞間。
  怎樣有效檢測并清除支原體污染呢?
  支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染、培養(yǎng)的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。細胞培養(yǎng)工作中,主要從控制環(huán)境污染、嚴格實驗操作、細胞培養(yǎng)和器材要保證無菌以及在細胞培養(yǎng)中加入適量的抗生素來預(yù)防支原體的污染。
  如果受到支原體污染時,細胞形態(tài)較之無明顯變化,極易被忽視,往往直到污染非常嚴重時才能發(fā)現(xiàn)。受污染的細胞膜上可能有幾百個支原體,這些支原體競爭營養(yǎng)并釋放有毒的代謝產(chǎn)物,嚴重影響實驗結(jié)果。

 

 

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