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技術(shù)文章 / article
對細(xì)胞株的污染鑒定與處理解讀
原載自：m.niangtai.cn[技術(shù)資料頻道] 2022-09-09 瀏覽次數(shù)：1100
細(xì)胞株的無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%酒精擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之中央無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的污染也會造成細(xì)胞株培養(yǎng)的污染，所以實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要定期進(jìn)行消毒。例如試驗(yàn)臺、超凈臺、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門把手、電話等細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境被支原體污染，可引起細(xì)胞的污染。應(yīng)定期對工作區(qū)域進(jìn)行消毒。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%，因而細(xì)胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。細(xì)胞培養(yǎng)中常遇見的有細(xì)菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染，估計(jì)細(xì)胞株培養(yǎng)的老手都知道，支原體污染非常不易察覺。有的實(shí)驗(yàn)室被支原體污染后，如果不進(jìn)行有效*的支原體清除，該實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)很難進(jìn)行下去，細(xì)胞傳三代以后狀態(tài)就急劇下滑，無法進(jìn)行正常實(shí)驗(yàn)，有的實(shí)驗(yàn)室甚至只能指望換細(xì)胞間。
怎樣有效檢測并清除支原體污染呢？
支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染、培養(yǎng)的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從控制環(huán)境污染、嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作、細(xì)胞培養(yǎng)和器材要保證無菌以及在細(xì)胞培養(yǎng)中加入適量的抗生素來預(yù)防支原體的污染。
如果受到支原體污染時(shí)，細(xì)胞形態(tài)較之無明顯變化，極易被忽視，往往直到污染非常嚴(yán)重時(shí)才能發(fā)現(xiàn)。受污染的細(xì)胞膜上可能有幾百個(gè)支原體，這些支原體競爭營養(yǎng)并釋放有毒的代謝產(chǎn)物，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
