IL-12介紹

1989年，白細(xì)胞介素-12（IL-12）從EB病毒轉(zhuǎn)化的B淋巴細(xì)胞上清液中被鑒定出來，當(dāng)加入人外周血淋巴細(xì)胞時(shí)，因其能誘導(dǎo)干擾素（IFN）-γ和自然殺傷（NK）介導(dǎo)的細(xì)胞毒性而被命名為“自然殺傷刺激因子"。這種促炎癥的異源二聚體細(xì)胞因子由共價(jià)連接的p40和p35亞基組成，是IL-12細(xì)胞因子家族中的一員，該家族還包括IL-23、IL-27、IL-35和IL-39等因子。IL-12和IL-23都是復(fù)合型細(xì)胞因子，有一個(gè)共同的IL-12 p40亞基并共用IL-12Rβ1受體，而其因子特異性則主要由IL-12 p35亞基以及IL-23p19亞基分別與IL-12Rβ2受體以及IL-23R受體結(jié)合而得到區(qū)分。p35和p40基因都需要在同一個(gè)細(xì)胞內(nèi)表達(dá)并形成具有活性的異源二聚體并隨后介導(dǎo)IL-12通路信號(hào)的產(chǎn)生。

吞噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞受到細(xì)菌和微生物刺激后會(huì)分泌產(chǎn)生IL-12，伴隨抗原呈遞，IL-12誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞分化為產(chǎn)生IFN-γ的輔助性T細(xì)胞1（Th1）以及誘導(dǎo)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞和NK細(xì)胞。這些Th1細(xì)胞對(duì)細(xì)胞內(nèi)病原體微生物（如嗜肺軍團(tuán)菌、結(jié)核分枝桿菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌和沙門氏菌屬等）產(chǎn)生反應(yīng)和促進(jìn)滯發(fā)性超敏反應(yīng)和巨噬細(xì)胞活化。

NK、B和T細(xì)胞是主要的表達(dá)IL-12受體的細(xì)胞，IL-12介導(dǎo)的信號(hào)通過將酪氨酸激酶TYK2和JAK2分別招募到IL-12Rβ1以及IL-12Rβ2來啟動(dòng)信號(hào)傳遞，隨后這些激酶會(huì)進(jìn)一步磷酸化并激活下游的轉(zhuǎn)錄因子STAT4， 隨后STAT4復(fù)合物轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核，與Jun癌基因（c-Jun）一起，與IFN-γ啟動(dòng)子結(jié)合，導(dǎo)致IFN-γ轉(zhuǎn)錄和Th1分化。此外，IL-12相關(guān)的IFN-γ產(chǎn)生會(huì)進(jìn)一步誘導(dǎo)趨化因子CXCL10的產(chǎn)生，進(jìn)而抗血管生成。

IL-12與免疫類疾病的相關(guān)性及藥物開發(fā)

在體內(nèi)中，IL-12和IL-23由組織中的樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等“預(yù)警細(xì)胞"生成。在IL-12和IL-27的共同作用下CD4+ 輔助T細(xì)胞（Th）會(huì)分化為表達(dá)干擾素γ（IFNγ）的Th1細(xì)胞。而IL-23會(huì)與其它細(xì)胞因子共同作用，促使CD4+ Th細(xì)胞分化為Th17細(xì)胞，同時(shí)刺激Th17細(xì)胞分泌IL-17家族細(xì)胞因子，這些因子具有促炎癥的作用。

急性炎癥反應(yīng)是身體對(duì)抗外來病原體入侵所產(chǎn)生的反應(yīng)，然而當(dāng)體內(nèi)炎癥相關(guān)細(xì)胞因子的水平失衡時(shí)，會(huì)引發(fā)炎癥持續(xù)發(fā)生，導(dǎo)致風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸?。↖BD，通常包括克羅恩病和潰瘍性腸炎）、脊柱關(guān)節(jié)炎（SpA）和銀屑病等慢性免疫類疾病。由于IL-12、IL-23/IL-17信號(hào)通路在釋放促炎癥細(xì)胞因子方面的重要作用，這一信號(hào)通路也成為開發(fā)治療慢性炎癥疾病的熱門靶標(biāo)，催生了多款重磅藥物和在研療法。

由強(qiáng)生開發(fā)的Ustekinumab是一款針對(duì)IL-12和IL-23的抗體拮抗劑，它可以特異性的結(jié)合白細(xì)胞介素IL-12和IL-23的p40蛋白亞單位，通過同時(shí)抑制IL-12和IL-23相關(guān)信號(hào)通路來達(dá)到治療慢性炎癥相關(guān)的免疫類疾病。該藥自上市以來，已獲批中重度斑塊狀銀屑病、活動(dòng)性銀屑病關(guān)節(jié)炎、中重度活動(dòng)性克羅恩病以及中重度活動(dòng)性潰瘍性結(jié)腸炎等多個(gè)相關(guān)適應(yīng)癥。在國內(nèi)，康方生物自主開發(fā)的抗IL-12/IL-23單克隆抗體注射液AK101 也屬于同類產(chǎn)品，該藥物目前處于臨床實(shí)驗(yàn)階段，開展了針對(duì)中重度斑塊狀銀屑病、中重度潰瘍性結(jié)腸炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡適應(yīng)癥等多個(gè)臨床研究。

IL-12與腫瘤免疫的相關(guān)性及藥物開發(fā)

多項(xiàng)研究表明，IL-12可以通過多種免疫調(diào)節(jié)機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤的作用，其作用機(jī)制主要有：

1）通過調(diào)節(jié)T細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞免疫發(fā)揮抗腫瘤作用；

2）通過誘生IFN-γ介導(dǎo)抗腫瘤效應(yīng)；

3）通過抑制血管生成發(fā)揮抗腫瘤作用。已有的數(shù)據(jù)表明修飾過的IL-12或人工合成的IL-12激動(dòng)劑與PD-1&PD-L1, CTLA4等免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)用可產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，增強(qiáng)藥物的抗腫瘤作用。以IL-12為靶點(diǎn)，開發(fā)腫瘤免疫相關(guān)療法的多項(xiàng)臨床研究也正在進(jìn)行中。（如下表所示）

針對(duì)IL-12藥物的研發(fā)，科佰生物開發(fā)了相關(guān)細(xì)胞篩選模型，可用于細(xì)胞水平篩選IL-12激動(dòng)劑或拮抗劑活性。

部分產(chǎn)品數(shù)據(jù)

IL12 Effector Reporter cell CBP74134

Figure 1. Dose Response of Recombinant Human IL12 in Human IL12 Effector Reporter Cells (C2).

Figure 2. Inhibition of IL12-induced Reporter Activity by IL-12/IL -23 p40 Neutralizing Antibody in IL12 Effector Reporter Cells (Clone2).