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細胞株的表達量越高越好嗎?

原載自:m.niangtai.cn[技術資料頻道]  2021-09-07  瀏覽次數(shù):1475

   外源蛋白在宿主細胞中的表達過程即為外源基因導入-轉錄-翻譯-蛋白質折疊加工分泌的過程。然而宿主細胞是活的生命體,微米級別的小小生命體內(nèi)運行著一套精巧復雜的自有法則,在大部分常規(guī)的穩(wěn)定細胞株構建過程中,往往只能利用脂質體、電穿孔等方法進行一步的播種,目的基因進入細胞內(nèi)部后生根發(fā)芽開花結果等一系列微觀過程則難以掌控。因此,在從基因到蛋白的任何步驟出問題,都有可能影響最終的細胞株表達量。
  有研究建立了一個診斷模型來探究造成細胞株表達量低的因素,具有一定的參考價值。對于一個表達量低于預期的Mab A,可選取一個表達量正常的Mab B進行對照,利用定點整合的方法構建細胞株以大程度地排除隨機整合帶來的基因水平異質性。
  對于細胞株的表達量是越高越好嗎?
  這個答案無疑是否定的。表達量是評價細胞株重要卻不*的維度,從整個項目周期來看,最終克隆的確起到了一錘定音的效果,后續(xù)的工作都必須圍繞著它進行。因此,在敲定最后的細胞株之前應當為未來環(huán)節(jié)考慮,挑選生長理想、代謝穩(wěn)定、產(chǎn)物質量符合要求的細胞株,而不是一味追求高表達量。
  此外,基于國內(nèi)藥品集采后的現(xiàn)實形勢,成本控制顯得尤為重要。不少研究建立模型以研究抗體產(chǎn)量與生產(chǎn)成本之間動態(tài)變化過程。追求高表達細胞株的最現(xiàn)實因素莫過于后續(xù)生產(chǎn)的上游規(guī)模和成本,相對于高表達細胞株而言,低表達細胞株無疑使得上游成本占主導位置,因此提高表達量是優(yōu)化上游生產(chǎn)成本的關鍵。研究表明,當細胞株蛋白表達量從0.5g/L增至5g/L,單抗生產(chǎn)成本大幅度降低。然而對于下游而言,在同等發(fā)酵體積下,細胞株表達量的提高意味著下游填料量的增大,從而使下游成本迅速提高。

 

 

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