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細(xì)胞株的表達(dá)量越高越好嗎?

原載自:m.niangtai.cn[技術(shù)資料頻道]  2021-09-07  瀏覽次數(shù):1501

   外源蛋白在宿主細(xì)胞中的表達(dá)過(guò)程即為外源基因?qū)?轉(zhuǎn)錄-翻譯-蛋白質(zhì)折疊加工分泌的過(guò)程。然而宿主細(xì)胞是活的生命體,微米級(jí)別的小小生命體內(nèi)運(yùn)行著一套精巧復(fù)雜的自有法則,在大部分常規(guī)的穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建過(guò)程中,往往只能利用脂質(zhì)體、電穿孔等方法進(jìn)行一步的播種,目的基因進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部后生根發(fā)芽開(kāi)花結(jié)果等一系列微觀過(guò)程則難以掌控。因此,在從基因到蛋白的任何步驟出問(wèn)題,都有可能影響最終的細(xì)胞株表達(dá)量。
  有研究建立了一個(gè)診斷模型來(lái)探究造成細(xì)胞株表達(dá)量低的因素,具有一定的參考價(jià)值。對(duì)于一個(gè)表達(dá)量低于預(yù)期的Mab A,可選取一個(gè)表達(dá)量正常的Mab B進(jìn)行對(duì)照,利用定點(diǎn)整合的方法構(gòu)建細(xì)胞株以大程度地排除隨機(jī)整合帶來(lái)的基因水平異質(zhì)性。
  對(duì)于細(xì)胞株的表達(dá)量是越高越好嗎?
  這個(gè)答案無(wú)疑是否定的。表達(dá)量是評(píng)價(jià)細(xì)胞株重要卻不*的維度,從整個(gè)項(xiàng)目周期來(lái)看,最終克隆的確起到了一錘定音的效果,后續(xù)的工作都必須圍繞著它進(jìn)行。因此,在敲定最后的細(xì)胞株之前應(yīng)當(dāng)為未來(lái)環(huán)節(jié)考慮,挑選生長(zhǎng)理想、代謝穩(wěn)定、產(chǎn)物質(zhì)量符合要求的細(xì)胞株,而不是一味追求高表達(dá)量。
  此外,基于國(guó)內(nèi)藥品集采后的現(xiàn)實(shí)形勢(shì),成本控制顯得尤為重要。不少研究建立模型以研究抗體產(chǎn)量與生產(chǎn)成本之間動(dòng)態(tài)變化過(guò)程。追求高表達(dá)細(xì)胞株的最現(xiàn)實(shí)因素莫過(guò)于后續(xù)生產(chǎn)的上游規(guī)模和成本,相對(duì)于高表達(dá)細(xì)胞株而言,低表達(dá)細(xì)胞株無(wú)疑使得上游成本占主導(dǎo)位置,因此提高表達(dá)量是優(yōu)化上游生產(chǎn)成本的關(guān)鍵。研究表明,當(dāng)細(xì)胞株蛋白表達(dá)量從0.5g/L增至5g/L,單抗生產(chǎn)成本大幅度降低。然而對(duì)于下游而言,在同等發(fā)酵體積下,細(xì)胞株表達(dá)量的提高意味著下游填料量的增大,從而使下游成本迅速提高。

 

 

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