進行細胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫(yī)藥的研究都采用培養(yǎng)細胞來進行，這些細胞可能是受贈于其它研究人員,也可能是從細胞庫(如美國?ATCC,American?Type?Culture?Collection)得來。據(jù)估計，15-20%的實驗室，實驗中所使用的細胞已經(jīng)不是原來的細胞系，或者與其它細胞系發(fā)生了交叉污染。顯然，細胞系遭到污染、特征鑒別錯誤，將會極大的威脅著基于這些細胞而發(fā)表的論文質(zhì)量和研究發(fā)現(xiàn)的正確性。為此，很多細胞庫現(xiàn)在都要對提交來的細胞系進行鑒定，并對細胞系之間的交叉污染進行監(jiān)測。

　　現(xiàn)在很多機構(gòu)都已經(jīng)認識到這個的重要性，ATCC和FDA，這些機構(gòu)要求對用于制藥領(lǐng)域的實驗中所使用的材料?—?諸如細胞系?—?應(yīng)該進行“身份鑒定”和純度測試。很多雜志也要求使用細胞系的文章提供STR指紋圖譜數(shù)據(jù)。

　　FDA建議研究人員在培養(yǎng)細胞的較早階段(細胞培養(yǎng)第一周)來鑒定細胞系的身份。細胞在被凍存前應(yīng)再一次進行鑒定；對于活躍生長的細胞，每兩個月應(yīng)鑒定一次；文獻發(fā)表前也應(yīng)對細胞系身份進行鑒定。

　　細胞如何運輸？收到細胞后如何處理？

　　從美國運輸過來的原裝 ATCC 細胞都是冰凍形式，采用干冰運輸?shù)姆绞?。在收到凍存細胞后，很重要的一點是迅速復蘇。

　　如果做不到立即復蘇，需將細胞存儲在液氮中。請不要將細胞存放在 -80 ℃ 冰箱，這會使細胞存活率迅速下降。

　　使用什么培養(yǎng)基？

　　復蘇細胞時需要準備合適的培養(yǎng)基，血清和細胞生長所需的添加劑。雖然大多數(shù)細胞系可以在不止一種培養(yǎng)基中生長，但是當培養(yǎng)基改變時，細胞的性質(zhì)也會變化。

　　另外，有的培養(yǎng)基如 DMEM，各廠商提供產(chǎn)品雖然名稱相同，但成分也會有差異。為了保證細胞最大的復蘇率和維持細胞特性，建議購買細胞的時候，同時購買 ATCC 的培養(yǎng)基（見產(chǎn)品信息說明書和 ATCC 網(wǎng)站）。

　　收到細胞后為什么沒有說明書？

　　為了響應(yīng)環(huán)保號召，以及保證信息的快速更新。ATCC 細胞株寄送時沒有隨貨附帶紙質(zhì)版說明書。

　　ATCC細胞系說明書有關(guān)于細胞復蘇和傳代的詳細步驟。除說明書外，還有另外一份重要文件——COA（Certificate of Analysis）。COA 中包含具體批次信息，如每管細胞的數(shù)量，建議復蘇使用的培養(yǎng)基用量，已知細胞的傳代代次等重要信息。

>> 返回首頁