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技術文章 / article
細胞株培養(yǎng)對于培養(yǎng)液的要求及相關常識說明
原載自：[技術資料頻道] 2020-10-24 瀏覽次數(shù)：1086
細胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物，也就是說細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。
細胞株體外培養(yǎng)在培養(yǎng)液中應能滿足細胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。
培養(yǎng)液pH對細胞生長的影響：
由于大多數(shù)細胞適宜PH值為7.2-7.4，偏離此范圍對細胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細胞對PH值要求也不*相同，原代細胞培養(yǎng)一般對PH值變動耐受差，無限細胞系耐受力強。
總體來說，細胞耐酸性比耐堿性強一些，偏酸環(huán)境中更有利于細胞的生長。因此，配制培養(yǎng)用液時可把液體的PH值稍微調(diào)的偏酸一些。液體在經(jīng)過0.1um或0.2um濾膜過濾時，PH值會向上浮動0.2左右。
培養(yǎng)液滲透壓對細胞生長的影響：
當細胞內(nèi)、外環(huán)境的分子濃度不同時就會產(chǎn)生滲透壓。這種情況下，水分通過滲透流入或流出細胞，從而改變細胞的內(nèi)環(huán)境。高滲透壓迫使水分從細胞中擴散出來導致細胞收縮，這種情況會使DNA和蛋白遭到破壞，細胞周期停滯以及終使細胞死亡；反之，低滲透壓使水分流入細胞內(nèi)，使細胞腫脹破裂。
培養(yǎng)液中谷氨酰胺的作用：
幾乎所有的細胞對谷氨酰胺都有較高的要求。谷氨酰胺脫掉氨基后，可作為培養(yǎng)細胞的能量來源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷氨酰胺時，細胞生長不良而死亡。所以各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。
谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應置-20℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲存兩周以上時，應重新加入原來量的谷氨酰胺。
