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技術(shù)文章 / article
認識一下北京細胞庫的檢測項目
原載自：[技術(shù)資料頻道] 2019-11-22 瀏覽次數(shù)：4147
認識一下北京細胞庫的檢測項目
北京細胞庫的檢測項目包括細胞鑒別，支原體、細菌、真菌、分枝桿菌檢查，內(nèi)外源病毒污染檢查，染色體檢查成瘤性和致瘤性檢查。
北京細胞庫各個檢測項目檢測方法：
1.細胞鑒別：
選擇下述一種或幾種方法對細胞進行種屬和細胞株間及專屬性的鑒別。
①生物化學(xué)法：同工酶試驗；
②免疫學(xué)檢測：組織相容性抗原、種特異性免疫血清；
?、奂毎z傳學(xué)檢測：染色體核型、標記染色體檢測；
?、苓z傳標記檢測：DNA指紋圖譜、STR、RELP-PCR、EPIC-PCR；
⑤其他方法：雜交法、PCR法、報告基因法等。
2.支原體、細菌、真菌、分枝桿菌檢查：
?、偌毦⒄婢鸁o菌檢查
直接接種法：凍存細胞，取總數(shù)量1%或≥2支（取量大者）；
薄膜過濾法：混合細胞培養(yǎng)上清。
②分枝桿菌檢查
培養(yǎng)法：羅氏培養(yǎng)基或Middlebrook 7H10培養(yǎng)基；
豚鼠接種法：需進行結(jié)核菌素試驗和解剖檢查。
?、壑гw檢查
培養(yǎng)法；
指示細胞培養(yǎng)法（DNA染色法）。
無菌檢測、分枝桿菌檢測環(huán)境要求：GMP級別，B+A環(huán)境。
3.成瘤性和致瘤性檢查：
?、俪闪鲂詸z查
新建細胞系/株應(yīng)進行成瘤性檢查；
已證明具有成瘤性的傳代細胞不再做成瘤性檢查，如：BHK21、CHO、HEK293、C127、NS0、雜交瘤細胞等。
②致瘤性檢查
新型細胞基質(zhì)，特別是成瘤性為陽性的細胞，用于疫苗生產(chǎn)時，需檢測致瘤性。
以下細胞不要求進行致瘤性檢查：
CHO、NS0、Sp2/0、低代次Vero細胞；
MRC-5、2BS、KMB17、WI38及FRhL-2細胞。
