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ATCC細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明

原載自:m.niangtai.cn[技術(shù)資料頻道]  2017-01-11  瀏覽次數(shù):2000

   培養(yǎng)ATCC細(xì)胞的生存環(huán)境是培養(yǎng)瓶、器皿或其他容器,生存空間及營(yíng)養(yǎng)是有限的。當(dāng)細(xì)胞增殖到一定密度后,分離出一部分細(xì)胞和更新?tīng)I(yíng)養(yǎng)液,使細(xì)胞更好地生存,這一過(guò)程稱(chēng)之為“傳代”
  ATCC細(xì)胞實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
  1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
  2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
  3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
  4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
  5.如果ATCC細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
  ATCC細(xì)胞收到復(fù)蘇好的細(xì)胞的處理方法:
  1. 先從外包裝盒拿出離心管,在離心管表面噴一層酒精,并小心去掉封口膜;
  2. 將離心管中的細(xì)胞在超凈工作臺(tái)內(nèi)取出一部分進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)(詳見(jiàn)細(xì)胞凍存)。
  3. 如細(xì)胞密度小于3×106/ml,可直接將離心管中的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到T25瓶中,置于37°C,5% CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
  4. 如ATCC細(xì)胞密度超過(guò)3×106/ml,操作步驟參照(細(xì)胞傳代)。

 

 

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